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Polyvecta DNA转染试剂

产品货号

产品规格

市场指导价

AC0031S

0.75 mL

1050元

AC0031M

1 mL

1520元

AC0031L

1.5 mL

2450元


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产品信息

QQ截图20220427141308.png

产品介绍

Polyvecta DNA Transfection Agent是新一代稳定、高效、实惠的瞬时转染试剂,其具有与DNA稳定结合、有效进入细胞和逃离内质的能力,因此在细胞转染过程中,具有卓越、低毒的出色表现。Polyvecta DNA Transfection Agent广泛适用于多种类型的细胞系,且与其他市售转染试剂相比,能够在不损伤细胞条件下高效转染。

产品特色

具有极高的转染效率;

应用范围广,适用于贴壁和悬浮细胞,可满足瞬时转染和稳定转染;

细胞毒性小,且转染稳定;

稳定性好,4℃保存长达一年;

操作简单;

经济节约,较同类试剂花费更少。

转染步骤

1. 细胞接种 

提前一天将待转染细胞接种于合适器皿中,调整细胞数量与浓度,应保证转染时细胞密度约为60%-80%。(请根据细胞种类自行调整细胞密度)

QQ截图20220427141331.png 

2. 配制转染复合物

1) 将质粒/DNA、Polyvecta转染试剂和对应培养基升至室温,依据对应比例使用无血清/蛋白稀释液及分别稀释Polyvecta和DNA,并充分混匀,室温静置孵育5分钟。(稀释液推荐采用无血清OPTI-MEM、DMEM或1640);

2) 将Polyvecta稀释液加入DNA稀释液中,充分混匀(可涡旋震荡或使用移液枪吹打混匀)后室温静置孵育15分钟形成转染复合物。

QQ截图20220427141405.png

注:DNA与转染试剂的用量比例是决定转染效率的重要因素,且不同实验条件如细胞品系、细胞状态、DNA/质粒纯度等均会造成转染效率差异,因此建议在正式实验前设置预实验对DNA与Polyvecta比例进行优化调整,推荐优化范围为1:1-1:4以供参考。 

3. 细胞转染

将转染复合物加入至含细胞的无血清培养基的器皿中,轻柔混匀,放置于CO2细胞培养箱中继续培养约6-10小时后更换为含有血清的完全培养基,继续培养。

4. 转染效果检测

转染48-72小时内,均可进行DNA转染效果的检测,最佳检测时间与细胞类型和培养条件相关,对转染结果进行检测后可进行其他接续实验。以下为几种常用的转染结果检测方法:

对于质粒无荧光标签的转染结果可采用试试荧光定量PCR等方法检测靶基因的mRNA水平变化或Western blot方法检测靶基因的蛋白水平;

对于带有荧光标签质粒转染结果可直接使用荧光显微镜观察荧光。

部分细胞转染效果

图片1.png


常见问题及解决方案 

QQ截图20220427141420.png

保存条件

冰袋运输,收到后置于4℃保存,有效期1年。

注意事项

1. 为了您的安全与健康,请着实验服并佩戴一次性手套进行操作,如不慎沾染,请立即使用流水清洗。请用户使用前务必认真阅读本册;

2. 请务必使用请务必使用高质量的无内毒素质粒。通过260 nm光吸收测定DNA浓度,260nm/280nm比值确定DNA纯度(比值应该在1.8~2.0的范围之内);

3. 请使用适当保存和经常传代的健康细胞。确保培养基没有被细菌、真菌或支原体污染。如果细胞是近期复苏的液氮冻存细胞,请在转染前至少传代两次。

4. 对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞,在转染前两天铺板可显著提高重组蛋白的表达水平。如果选择转染前两天铺板,可适当降低铺板密度,以确保转染时细胞的汇合度仍为60-80%。

5. 对于接触抑制敏感的细胞,可适当降低铺板密度。


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