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细胞增殖和毒性检测试剂盒(CCK8)

产品货号

产品规格

市场指导价

AC0011S

500 T

485元

AC0011M

1000 T

885元

AC0011L

3000 T

1815元


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产品介绍

AR 细胞增殖和毒性检测试剂盒(CCK8)是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒,其性能优于市面上进口和国产的CCK8试剂盒。

WST-8是一种类似于MTT的化合物,在电子耦合剂1-Methoxy PMS存在的情况下,可以被还原生成橙黄色水溶性的甲臜(Formazan)。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。

产品特色

· 敏度可靠 灵敏度高,数据可靠,重现性好;

· 适用性广 针对贴壁细胞和悬浮细胞,均有良好的表现;适合于高通量药物筛选;

· 安全低毒 无需放射性同位素和有机溶剂,对细胞毒性低。

操作步骤

1. 制作标准曲线

a. 先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,然后接种细胞;

b. 按比例依次用培养基等比稀释成细胞浓度梯度,一般要做5-7个细胞浓度梯度,每组4-6个复孔;

c. 接种后培养2-4小时使细胞贴壁,然后每100 μL培养基加10 μL本品培养一定时间后测定OD值,制作出一条以细胞数量为横坐标,OD值为纵坐标的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量。使用此标准曲线的前提条件是试验条件完全一致。

2. 细胞活性检测/细胞增殖-毒性检测

a. 在96孔板中接种细胞悬液(100 μL/孔),将培养板放在培养箱中预培养24小时;

b. 向培养板加入不同浓度的待测药物;(非必选步骤)

c. 将培养板在培养箱孵育一段适当的时间;(非必选步骤)

d. 向每孔加入10 μL的本品(注意不要产生气泡);

e. 将培养板置于培养箱内孵育1-4小时;

f. 用酶标仪测定在450 nm处的吸光度。

注:加入CCK-8试剂后震荡混匀。

4. 计算公式

细胞存活率=[(As-Ab) / (Ac-Ab)] × 100%         抑制率=[(Ac-As) / (Ac-Ab)] × 100%

As: 实验孔吸光度(含细胞、培养基、CCK8溶液和药物溶液);

Ac: 对照孔吸光度(含细胞、培养基、CCK8溶液,不含药物);

Ab: 空白孔吸光度(含培养基、CCK8溶液,不含细胞、药物)。

注:如果待测药物有氧化性或还原性,可在加入本品之前更换新鲜培养基,去掉待测药物的影响。当待测药物影响比较小的情况下可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入待测药物后的空白吸收即可。

保存条件

避光保存;4 ℃,可保存1年;-20 ℃,可保存2年。切勿反复冻融。

注意事项

1. 第一次做实验时,建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入本品后的培养时间。

2. 有条件的情况下建议采用多通道移液器,可以减少平行孔间的差异。加本品时,建议斜贴着培养板壁加,不要插到培养基液面下加,容易产生气泡,会干扰O.D值读数。

3. 如果培养基里有氧化还原性物质,可能会产生误差,必须更换其它培养基。

4. O.D.值在0.1-2.0范围内均属正常,在1.0附近误差最小。

5. 本品不适用于植物细胞,酵母细胞及各类组织的检测。

6. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗、食品及化妆品等用途。

7. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


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