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快速转膜液(20×)

产品货号

产品规格

市场指导价

AP0221

500 mL

296元


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产品介绍

AR快速转膜液(20×) AR生产的快速转膜液(20×),即Rapid Transfer Buffer (20×),是一种20倍浓缩用于 Western blot时湿法快速转膜的缓冲液,能高效快速地将蛋白转移到印迹膜(PVDF 或NC膜)上,期间不使用甲醇,能在30分钟内完成转膜过程。

产品特色

· 高效安全 不使用甲醇,减少有毒试剂使用;

· 快速稳定 能在15-30min完成转膜过程,减少蛋白损失;

· 兼容性好 适用蛋白分子量范围更宽,条带更锐利,兼容Laemmli胶,预制胶,FastPAGE,Bis-Tris胶等多种凝胶;

· 无需低温 产热少,转印时无需放置冰袋。

操作步骤

1. 快速转膜液的配制:

a. 量取50毫升的快速转膜液(20×),倒入到洁净的量筒中,加入蒸馏水、超纯水或去离子水定容约900毫升。

b. 加入100毫升无水乙醇,充分混匀后即为快速转膜液(1×),可用于转膜。

c. 也可根据所需的转膜液量自行量取一定量的快速转膜液(20×)进行配制。

【注】:没有用完的快速转膜液可在常温或4ºC保存,通常两周内可以正常使用

2. 转膜条件:做好转印三明治结构,然后转移至转印槽中,设定400mA恒流25-30min即可很好地完成蛋白转膜。

【注】:40分钟时间内转膜不需要放冰上,转膜槽内外都不可放冰预冷,否则会影响效率。对于小分子量蛋白,可以适当减少转膜时间;同样对于大分子量蛋白,可以适当增加转膜时间。

保存条件

常温运输保存,4℃保存,有效期1年。

注意事项

1. 长时间在4ºC存放,如果出现沉淀,可以在水浴温育并充分溶解后再使用。

2. 建议使用分析纯级别的乙醇或更高纯度的乙醇。

3. 使用本产品转膜时,如果设定恒流为400mA,无论是同一个转膜槽中1或2块胶转膜,电压在开始时通常为60V左右。转膜效率和电场强度(electric field strength, 用E表示)以及蛋白所带的电荷相关,而电场强度主要和电压及电极之间的距离相关,即E=U/d。

4. 由于用于转膜的电源品牌和型号的不同,一方面最高电流差异较大,另一方面功率也会有较大差别。通常大功率的电源相对贵一些,也更适合用于转膜。有些电源会自动降低电压或电流,有些则会报错并停止转膜。

5. 转膜时,如果出现报错而停止,需要根据情况查看是否是电压或电流过载,或者是如转膜液过多或过少、转膜槽的短路或断路等异常情况。

6. 对于出现停止转膜的情况,需要调低电流或电压,或者选择功率更大的电源。

7. 转膜时转膜液的温度、凝胶的参数(如数量、厚度、离子浓度、丙烯酰胺浓度等)、滤纸的厚度、同时使用的转膜槽数量、 转膜液的离子浓度、转膜液的体积、转膜液使用的次数等都可能会影响电流和电压。

8. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

9. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


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